بهترین روش کدام است؟
- آزمایشات برای تشخیص عفونت SARS-CoV-2
برای موارد تایید شده COVID-19، علائم بالینی شایع گزارش شده شامل تب، سرفه، میالژی یا خستگی است.با این حال، این علائم ویژگی های منحصر به فرد COVID-19 نیستند، زیرا این علائم شبیه به سایر بیماری های آلوده به ویروس مانند آنفولانزا است.در حال حاضر، ویروس نوکلئیک اسید Real-Time PCR (rt-PCR)، تصویربرداری CT و برخی پارامترهای هماتولوژی، ابزار اولیه برای تشخیص بالینی عفونت هستند.بسیاری از کیت‌های آزمایش آزمایشگاهی توسط CDC چین در آزمایش نمونه‌های بیماران برای COVID-19 ساخته و استفاده شده است.1CDC ایالات متحده2و سایر شرکت های خصوصیآزمایش آنتی بادی IgG/IgM، یک روش تست سرولوژیکی، همچنین به عنوان معیار تشخیصی در نسخه به روز شده دستورالعمل تشخیص و درمان بیماری کروناویروس جدید (COVID-19) که در 3 مارس صادر شد، اضافه شده است.1.تست اسید نوکلئیک ویروس rt-PCR هنوز روش تشخیصی استاندارد فعلی برای تشخیص COVID-19 است.
StrongStep®کیت جدید Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR (تشخیص سه ژن)
با این حال، این کیت‌های آزمایش PCR بلادرنگ که به دنبال مواد ژنتیکی ویروس هستند، به عنوان مثال در سواب‌های بینی، دهان یا مقعد، از محدودیت‌های زیادی رنج می‌برند:
1) این آزمایش‌ها زمان‌های طولانی دارند و در عملیات پیچیده هستند.آنها معمولاً به طور متوسط بیش از 2 تا 3 ساعت طول می کشند تا نتیجه ایجاد کنند.
2) آزمایشات PCR برای کار به آزمایشگاه های دارای گواهی، تجهیزات گران قیمت و تکنسین های آموزش دیده نیاز دارند.
3) تعدادی منفی کاذب برای rt-PCR کووید-19 وجود دارد.ممکن است به دلیل بار ویروسی کم SARS-CoV-2 در نمونه سواب تنفسی فوقانی باشد (کروناویروس جدید عمدتاً دستگاه تنفسی تحتانی مانند آلوئول های ریوی را آلوده می کند) و این آزمایش نمی تواند افرادی را که دچار عفونت شده اند، بهبود یافته و بهبود یافته را شناسایی کند. ویروس را از بدن آنها پاک کرد.
تحقیق لیرونگ زو و همکاران4دریافتند که بارهای ویروسی بالاتر بلافاصله پس از شروع علائم، با بارهای ویروسی بالاتر در بینی نسبت به گلو و الگوی دفع اسید نوکلئیک ویروسی در بیماران آلوده به SARS-CoV-2 شبیه بیماران مبتلا به آنفولانزا است.4و با آنچه در بیماران مبتلا به SARS-CoV-2 دیده می شود متفاوت به نظر می رسد.
یانگ پن و همکاران5نمونه‌های سریال (سواب گلو، خلط، ادرار و مدفوع) را از دو بیمار در پکن بررسی کرد و دریافت که بارهای ویروسی در نمونه‌های سواب گلو و خلط در حدود 5 تا 6 روز پس از شروع علائم به اوج خود رسید، نمونه‌های خلط عموماً بار ویروسی بالاتری را نشان دادند. نمونه های سواب گلوهیچ RNA ویروسی در نمونه ادرار یا مدفوع این دو بیمار شناسایی نشد.
آزمایش PCR تنها زمانی نتیجه مثبت می دهد که ویروس هنوز وجود داشته باشد.این آزمایش ها نمی توانند افرادی را که دچار عفونت شده اند، بهبود یافته و ویروس را از بدن خود پاک کرده اند، شناسایی کنند.در واقع، تنها حدود 30 تا 50 درصد از نظر PCR در بیماران مبتلا به پنومونی کروناویروس جدید با تشخیص بالینی مثبت بود.بسیاری از بیماران مبتلا به پنومونی کروناویروس جدید به دلیل منفی بودن آزمایش اسید نوکلئیک قابل تشخیص نیستند، بنابراین نمی توانند درمان مربوطه را به موقع دریافت کنند.از ویرایش اول تا ششم دستورالعمل ها، تنها بر اساس تشخیص نتایج آزمایش اسید نوکلئیک، که باعث دردسر بزرگی برای پزشکان شد. اولین "سوت دهنده"، دکتر لی ونلیانگ، چشم پزشک در مرکز ووهان بیمارستان، مرده است.او در طول زندگی خود سه آزمایش اسید نوکلئیک در مورد تب و سرفه انجام داد و آخرین بار نتیجه PCR مثبت شد.
پس از بحث و گفتگو توسط متخصصان، تصمیم بر آن شد که روش های آزمایش سرم به عنوان یک معیار تشخیصی جدید افزایش یابد.در حالی که آزمایش‌های آنتی‌بادی، که آزمایش‌های سرولوژیکی نیز نامیده می‌شوند، می‌توانند تایید کنند که آیا فردی حتی پس از پاکسازی سیستم ایمنی ویروس عامل COVID-19، آلوده شده است یا خیر.
تست سریع آنتی بادی StrongStep SARS-COV-2 IgG/IgM
آزمایش آنتی بادی IgG/IgM به ردیابی افراد مبتلا به عفونت به روشی بسیار مبتنی بر جمعیت کمک می کند، زیرا به نظر می رسد بسیاری از موارد از بیماران بدون علامتی که به راحتی قابل شناسایی نیستند سرایت می کنند.زوجی در سنگاپور، تست PCR همسرش مثبت شد، نتیجه آزمایش PCR همسرش منفی بود، اما نتایج آزمایش آنتی بادی نشان داد که او و همسرش آنتی بادی دارد.
سنجش های سرولوژیکی باید به دقت تایید شوند تا مطمئن شوند که به طور قابل اعتمادی واکنش نشان می دهند، اما فقط به آنتی بادی ها علیه ویروس جدید.یکی از نگرانی ها این بود که شباهت بین ویروس هایی که باعث سندرم حاد تنفسی می شوند و COVID-19 می تواند منجر به واکنش متقابل شود.IgG-IgM که توسط Xue Feng wang ساخته شده است6در نظر گرفته شد که می‌توان از آن به عنوان آزمایش نقطه‌ای مراقبت (POCT) استفاده کرد، زیرا می‌توان آن را در نزدیکی بالین با خون انگشتان دست انجام داد.این کیت دارای حساسیت 88.66 درصد و ویژگی 90.63 درصد است.با این حال، هنوز نتایج مثبت کاذب و منفی کاذب وجود داشت.
در نسخه به روز شده دستورالعمل تشخیص و درمان بیماری کروناویروس جدید (COVID-19) چین1موارد تایید شده به موارد مشکوکی گفته می شود که هر یک از معیارهای زیر را دارند:
(1) نمونه‌های دستگاه تنفسی، نمونه‌های خون یا مدفوع برای SARS-CoV-2 نوکلئیک اسید با استفاده از rt-PCR مثبت آزمایش شدند.
(2) توالی ژنتیکی ویروس از نمونه‌های مجاری تنفسی، خون یا مدفوع بسیار همولوگ با SARS-CoV-2 شناخته شده است.
(3) آنتی بادی IgM اختصاصی ویروس کرونا و آنتی بادی IgG سرم مثبت بودند.
(4) آنتی بادی IgG اختصاصی کروناویروس جدید سرم که از منفی به مثبت تبدیل شده است یا آنتی بادی IgG اختصاصی ویروس کرونا در طول دوره بهبودی 4 برابر بیشتر از آن در دوره حاد است.
تشخیص و درمان COVID-19
| رهنمودها | منتشر شد | معیارهای تشخیصی تایید شده |
| نسخه 7 | 3 مارس 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| نسخه 6 | 18 فوریه 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
ارجاع
1. رهنمودهایی برای تشخیص و درمان پنومونی کروناویروس جدید (نسخه آزمایشی 7، کمیسیون ملی بهداشت جمهوری خلق چین، صادر شده در 3 مارس 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. تحقیقات فقط از پروتکل RT-PCR بلادرنگ برای شناسایی 2019-nCoV استفاده کنید
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. سنگاپور ادعا می کند که برای اولین بار از آزمایش آنتی بادی برای ردیابی عفونت های ویروس کرونا استفاده کرده است
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. بار ویروسی SARS-CoV-2 در نمونه‌های تنفسی فوقانی بیماران آلوده 19 فوریه 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. بارهای ویروسی SARS-CoV-2 در نمونه‌های بالینی Lancet Infect Dis 2020 منتشر شده آنلاین در 24 فوریه 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. توسعه و کاربرد بالینی آزمایش آنتی بادی ترکیبی IgM-IgG سریع برای SARS-CoV-2
تشخیص عفونت XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
زمان ارسال: مارس-17-2020
