تست سریع فیبرونکتین جنین
استفاده هدفمند
گام قوی®تست PROM یک تست ایمونوکروماتوگرافی با تفسیر بصری است که برای تشخیص کیفی فیبرونکتین جنینی در ترشحات سرویکوواژینال استفاده می شود.وجود فیبرونکتین جنینی در ترشحات دهانه رحم بین هفته های 22، 0 روز و 34 هفته، 6 روز بارداری است.با افزایش خطر زایمان زودرس مرتبط است.
مقدمه
زایمان زودرس که توسط کالج آمریکایی متخصصین زنان و زایمان به عنوان زایمان قبل از هفته سی و هفتم بارداری تعریف شده است، مسئول اکثر عوارض و مرگ و میر پری ناتال غیر کروموزومی است.علائم تهدید زایمان زودرس شامل انقباضات رحمی، تغییر ترشحات واژن، خونریزی واژینال، کمردرد، ناراحتی شکمی، فشار لگن و گرفتگی است.روش‌های تشخیصی برای شناسایی خطر زایمان زودرس شامل نظارت بر فعالیت رحم و انجام معاینه دیجیتالی دهانه رحم است که امکان تخمین ابعاد دهانه رحم را فراهم می‌کند.نشان داده شده است که این روش ها محدود هستند، زیرا حداقل اتساع دهانه رحم (< 3 سانتی متر) و فعالیت رحم به طور طبیعی رخ می دهد و لزوماً تشخیص زایمان زودرس قریب الوقوع نیست.در حالی که چندین نشانگر بیوشیمیایی سرم مورد ارزیابی قرار گرفته است، هیچ یک به طور گسترده برای استفاده عملی بالینی پذیرفته نشده اند.
فیبرونکتین جنینی (fFN)، ایزوفرم فیبرونکتین، یک گلیکوپروتئین چسبنده پیچیده با وزن مولکولی تقریباً 500000 دالتون است.Matsuura و همکارانش یک آنتی بادی مونوکلونال به نام FDC-6 را توصیف کرده اند که به طور خاص III-CS را شناسایی می کند، ناحیه ای که ایزوفرم جنینی فیبرونکتین را مشخص می کند.مطالعات ایمونوهیستوشیمی جفت نشان داده است که fFN استمحدود به ماتریکس خارج سلولی ناحیه ای که محل اتصال را تعریف می کندواحدهای مادر و جنین در رحم
فیبرونکتین جنین را می توان در ترشحات دهانه رحم زنان در طول دوران بارداری با استفاده از روش ایمونواسی مبتنی بر آنتی بادی مونوکلونال تشخیص داد.فیبرونکتین جنین در ترشحات دهانه رحم در اوایل بارداری افزایش می یابد، اما در حاملگی های طبیعی از هفته 22 تا 35 کاهش می یابد.اهمیت وجود آن در واژن در هفته های اولیه بارداری مشخص نیست.با این حال، ممکن است به سادگی منعکس کننده رشد طبیعی جمعیت تروفوبلاست خارج از پرز و جفت باشد.گزارش شده است که تشخیص fFN در ترشحات دهانه رحم بین هفته های 22، 0 روز و 34 هفته و 6 روز حاملگی با زایمان زودرس در زنان باردار بدون علامت و بین هفته های 22، 0 روز و 30 هفته، 6 روز در زنان باردار بدون علامت همراه است.
اصل
گام قوی®تست fFN از تکنولوژی ایمونوکروماتوگرافی رنگی و جریان مویرگی استفاده می کند.روش آزمایش مستلزم حل شدن fFN از سواب واژن با مخلوط کردن سواب در بافر نمونه است.سپس بافر نمونه مخلوط به خوبی به نمونه کاست آزمایش اضافه می شود و مخلوط در امتداد سطح غشاء حرکت می کند.اگر fFN در نمونه وجود داشته باشد، با آنتی بادی ضد fFN اولیه که به ذرات رنگی کونژوگه شده است، کمپلکسی تشکیل می دهد.سپس این کمپلکس توسط دومین آنتی بادی ضد fFN که روی غشای نیتروسلولزی پوشانده شده است، متصل می شود.ظاهر شدن یک خط تست قابل مشاهده به همراه خط کنترل نشان دهنده نتیجه مثبت خواهد بود.
اجزای کیت
| 20 به صورت جداگانه پآکدستگاه های تست ed | هر دستگاه حاوی یک نوار با مزدوج های رنگی و معرف های واکنشی است که از قبل در نواحی مربوطه پوشش داده شده اند. |
| 2استخراجویال بافر | 0.1 مولار سالین بافر فسفات (PBS) و 0.02٪ آزید سدیم. |
| 1 سواب کنترل مثبت (فقط در صورت درخواست) | حاوی fFN و سدیم آزید باشد.برای کنترل خارجی |
| 1 سواب کنترل منفی (فقط در صورت درخواست) | حاوی fFN نیست.برای کنترل خارجی |
| 20 لوله های استخراج | برای آماده سازی نمونه ها استفاده کنید. |
| 1 ایستگاه کاری | محل نگهداری ویال ها و لوله های بافر. |
| 1 درج بسته | برای آموزش عملیات |
مواد مورد نیاز اما ارائه نشده است
| تایمر | برای استفاده از زمان |
موارد احتیاط
■ فقط برای استفاده تشخیصی حرفه ای در شرایط آزمایشگاهی.
■ بعد از تاریخ انقضای درج شده روی بسته بندی استفاده نشود.اگر کیسه فویل آن آسیب دیده است از تست استفاده نکنید.از آزمایشات استفاده مجدد نکنید.
■ این کیت حاوی محصولاتی با منشاء حیوانی است.دانش تایید شده از منشاء و/یا وضعیت بهداشتی حیوانات به طور کامل عدم وجود عوامل بیماریزای قابل انتقال را تضمین نمی کند.بنابراین، توصیه می شود که این محصولات به عنوان عفونی بالقوه در نظر گرفته شوند و با رعایت اقدامات احتیاطی معمول (از بلع یا استنشاق خودداری کنید) استفاده کنید.
■ با استفاده از ظرف جمع آوری نمونه جدید برای هر نمونه به دست آمده از آلودگی متقاطع نمونه ها خودداری کنید.
■ قبل از انجام هر آزمایشی، کل روش را به دقت بخوانید.
■ از خوردن، آشامیدن و سیگار کشیدن در محلی که نمونه ها و کیت ها استفاده می شوند خودداری کنید.با تمام نمونه ها طوری رفتار کنید که انگار حاوی عوامل عفونی هستند.اقدامات احتیاطی تعیین شده در برابر خطرات میکروبیولوژیکی را در طول فرآیند رعایت کنید و از روش های استاندارد برای دفع صحیح نمونه ها پیروی کنید.هنگام آزمایش نمونه ها از لباس های محافظ مانند کت های آزمایشگاهی، دستکش های یکبار مصرف و محافظ چشم استفاده کنید.
■ معرف های لات های مختلف را تعویض یا مخلوط نکنید.درب بطری محلول را مخلوط نکنید.
■ رطوبت و دما می توانند بر نتایج تأثیر منفی بگذارند.
■ هنگامی که روش سنجش کامل شد، سواب ها را پس از اتوکلاو در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت حداقل 20 دقیقه به دقت دور بیندازید.روش دیگر، آنها را می توان با هیپوکلرید سدیم 0.5٪ (یا سفید کننده خانگی) به مدت یک ساعت قبل از دفع درمان کرد.مواد آزمایش استفاده شده باید مطابق با مقررات محلی، ایالتی و/یا فدرال دور ریخته شوند.
■ از برس سیتولوژی برای بیماران باردار استفاده نکنید.
ذخیره سازی و پایداری
■ کیت باید در دمای 30-2 درجه سانتیگراد تا تاریخ انقضای چاپ شده روی کیسه مهر و موم شده نگهداری شود.
■ آزمایش باید تا زمان استفاده در کیسه مهر و موم شده باقی بماند.
■ منجمد نکنید.
■ برای محافظت از اجزای این کیت در برابر آلودگی باید مراقب بود.اگر شواهدی از آلودگی میکروبی یا بارش وجود دارد، از آن استفاده نکنید.آلودگی بیولوژیکی تجهیزات توزیع کننده، ظروف یا معرف ها می تواند منجر به نتایج نادرست شود.
جمع آوری و ذخیره سازی سموم
■ فقط از سواب های استریل با نوک داکرون یا ریون با شفت های پلاستیکی استفاده کنید.توصیه می شود از سواب تهیه شده توسط سازنده کیت استفاده کنید (سواب ها در این کیت موجود نیستند، برای اطلاعات سفارش لطفا با سازنده یا توزیع کننده محلی تماس بگیرید، شماره کاتالوگ 207000 است).سواب های دیگر تامین کنندگان تایید نشده اند.سواب با نوک نخی یا شفت چوبی توصیه نمی شود.
■ ترشحات دهانه رحم از فورنیکس خلفی واژن به دست می آید.فرآیند جمع آوری در نظر گرفته شده است که ملایم باشد.جمع آوری شدید یا نیرومند، معمول برای کشت های میکروبیولوژیکی، مورد نیاز نیست.در طول معاینه اسپکولوم، قبل از هرگونه معاینه یا دستکاری دهانه رحم یا مجرای واژن، نوک اپلیکاتور را به آرامی در سراسر فورنکس خلفی واژن به مدت تقریباً 10 ثانیه بچرخانید تا ترشحات دهانه رحم را جذب کند.تلاش‌های بعدی برای اشباع کردن نوک اپلیکاتور ممکن است آزمایش را باطل کند.اپلیکاتور را بردارید و آزمایش را طبق دستور زیر انجام دهید.
■ اگر آزمایش ممکن است فوراً انجام شود، سواب را روی لوله استخراج قرار دهید.اگر آزمایش فوری امکان‌پذیر نباشد، نمونه‌های بیمار باید در یک لوله انتقال خشک برای نگهداری یا حمل و نقل قرار داده شوند.سواب ها را می توان به مدت 24 ساعت در دمای اتاق (30-15 درجه سانتیگراد) یا یک هفته در دمای 4 درجه سانتیگراد یا حداکثر 6 ماه در دمای 20- درجه سانتیگراد نگهداری کرد.تمام نمونه ها باید قبل از آزمایش به دمای اتاق 30-15 درجه سانتیگراد برسند.
روش
آزمایش ها، نمونه ها، بافر و/یا کنترل ها را قبل از استفاده به دمای اتاق (30-15 درجه سانتی گراد) برسانید.
■ یک لوله استخراج تمیز در محل تعیین شده ایستگاه کاری قرار دهید.1 میلی لیتر بافر استخراج را به لوله استخراج اضافه کنید.
■ سواب نمونه را داخل لوله قرار دهید.محلول را به شدت با چرخاندن سواب در کناره لوله برای حداقل ده بار (در حالی که در آب است) مخلوط کنید.بهترین نتایج زمانی حاصل می شود که نمونه به شدت در محلول مخلوط شود.
■ هنگام برداشتن سواب، با فشار دادن طرف لوله استخراج انعطاف پذیر، تا حد امکان مایع را از سواب خارج کنید.حداقل 1/2 از محلول بافر نمونه باید در لوله باقی بماند تا مهاجرت مویرگی کافی رخ دهد.درپوش را روی لوله استخراج شده قرار دهید.
سواب را در ظرف مناسب زباله های خطرناک بیولوژیکی دور بریزید.
■ نمونه های استخراج شده می توانند به مدت 60 دقیقه در دمای اتاق باقی بمانند بدون اینکه بر نتیجه آزمایش تأثیر بگذارند.
■ آزمایش را از کیسه مهر و موم شده آن خارج کرده و روی سطح تمیز و هموار قرار دهید.دستگاه را با شناسه بیمار یا کنترل برچسب بزنید.برای به دست آوردن بهترین نتیجه، آزمایش باید در عرض یک ساعت انجام شود.
■ 3 قطره (تقریباً 100 میکرولیتر) از نمونه استخراج شده از لوله استخراج را به چاه نمونه روی کاست آزمایش اضافه کنید.
از به دام افتادن حباب های هوا در چاه نمونه (S) خودداری کنید و هیچ محلولی را در پنجره مشاهده رها نکنید.
با شروع آزمایش، حرکت رنگ در سراسر غشاء را مشاهده خواهید کرد.
■ صبر کنید تا نوار(های) رنگی ظاهر شود.نتیجه باید در 5 دقیقه خوانده شود.بعد از 5 دقیقه نتیجه را تفسیر نکنید.
لوله های آزمایش استفاده شده و کاست های آزمایش را در ظرف مناسب زباله های خطرناک بیولوژیکی دور بریزید.
تفسیر نتایج
| مثبتنتیجه:
| دو نوار رنگی روی غشاء ظاهر می شود.یک باند در ناحیه کنترل (C) و باند دیگر در ناحیه آزمایش (T) ظاهر می شود. |
| منفینتیجه:
| فقط یک نوار رنگی در ناحیه کنترل (C) ظاهر می شود.هیچ نوار رنگی ظاهری در ناحیه آزمایش (T) ظاهر نمی شود. |
| بی اعتبارنتیجه:
| باند کنترل ظاهر نمی شود.نتایج هر آزمایشی که نوار کنترلی در زمان خواندن مشخص شده تولید نکرده است باید دور ریخته شود.لطفا روش را مرور کنید و با یک تست جدید تکرار کنید.اگر مشکل همچنان ادامه داشت، فوراً استفاده از کیت را متوقف کنید و با توزیع کننده محلی خود تماس بگیرید. |
توجه داشته باشید:
1. شدت رنگ در ناحیه آزمایش (T) ممکن است بسته به غلظت مواد هدف موجود در نمونه متفاوت باشد.اما سطح مواد را نمی توان با این آزمایش کیفی تعیین کرد.
2. حجم ناکافی نمونه، روش عملکرد نادرست، یا انجام تست های منقضی شده محتمل ترین دلایل شکست باند کنترل هستند.
کنترل کیفیت
■ کنترل های رویه ای داخلی در آزمون گنجانده شده است.یک نوار رنگی که در ناحیه کنترل (C) ظاهر می شود به عنوان یک کنترل رویه مثبت داخلی در نظر گرفته می شود.این حجم نمونه کافی و تکنیک رویه صحیح را تایید می کند.
■ کنترل‌های رویه‌ای خارجی ممکن است (فقط در صورت درخواست) در کیت‌ها ارائه شود تا اطمینان حاصل شود که آزمایش‌ها به درستی کار می‌کنند.همچنین، کنترل ها ممکن است برای نشان دادن عملکرد مناسب توسط اپراتور آزمایش استفاده شوند.برای انجام تست کنترل مثبت یا منفی، مراحل بخش روش تست را انجام دهید و سواب کنترل را به همان روشی که یک سواب نمونه درمان می‌کنید، انجام دهید.
محدودیت های آزمون
1. این روش فقط برای تشخیص کیفی فیبرونکتین جنینی در ترشحات سرویکوواژینال قابل استفاده است.
2. نتایج آزمایش باید همیشه همراه با سایر داده های بالینی و آزمایشگاهی برای مدیریت بیمار استفاده شود.
3. نمونه ها باید قبل از معاینه دیجیتال یا دستکاری دهانه رحم تهیه شود.دستکاری دهانه رحم ممکن است منجر به نتایج مثبت کاذب شود.
4. اگر بیمار در عرض 24 ساعت رابطه جنسی داشته باشد تا نتایج مثبت کاذب از بین برود، نباید نمونه جمع آوری شود.
5. بیماران مشکوک یا شناخته شده جفت، جفت سرراهی، یا خونریزی متوسط یا شدید واژن نباید مورد آزمایش قرار گیرند.
6. بیماران مبتلا به سرکلاژ نباید مورد آزمایش قرار گیرند.
7. ویژگی های عملکرد StrongStep®تست fFN بر اساس مطالعات انجام شده در زنان با حاملگی تک قلو است.عملکرد در بیمارانی که چندقلو باردار هستند، تأیید نشده است.
8. گام قوی®آزمایش fFN در صورت وجود پارگی غشاهای آمنیوتیک در نظر گرفته نشده است و قبل از انجام آزمایش باید پارگی غشاهای آمنیوتیک را رد کرد.
ویژگی های عملکرد
جدول: تست fFN StrongStep® در مقابل تست fFN برند دیگر
| حساسیت نسبی: 97.96% (89.13%-99.95%)* ویژگی نسبی: 98.73% (95.50%-99.85%)* توافق کلی: 98.55% (95.82%-99.70%)* * فاصله اطمینان 95٪ |
| یه مارک دیگه |
| ||
| + | - | جمع | |||
| StrongStep®fFn تست | + | 48 | 2 | 50 | |
| - | 1 | 156 | 157 | ||
|
| 49 | 158 | 207 | ||
حساسیت تحلیلی
کمترین مقدار قابل تشخیص fFN در نمونه استخراج شده 50μg/L است.
در بین زنان علامت دار، سطوح بالا (≥ 0.050 میکروگرم در میلی لیتر) (1 x 10-7 mmol/L) fFN بین 24 هفته، 0 روز و 34 هفته، 6 روز نشان دهنده افزایش خطر زایمان در ≤ 7 یا ≤ 14 روز از مجموعه نمونهدر میان زنان بدون علامت، سطوح بالای fFN بین هفته های 22، 0 روز و 30 هفته، 6 روز نشان دهنده افزایش خطر زایمان در ≤ هفته 34 و 6 روز بارداری است.قطع 50 میکروگرم در لیتر fFN در یک مطالعه چند مرکزی برای ارزیابی ارتباط بین بیان فیبرونکتین جنین در دوران بارداری و زایمان زودرس ایجاد شد.
مواد مداخله گر
باید مراقب بود که اپلیکاتور یا ترشحات دهانه رحم با روان کننده ها، صابون ها، ضدعفونی کننده ها یا کرم ها آلوده نشود.روان کننده ها یا کرم ها ممکن است از نظر فیزیکی در جذب نمونه بر روی اپلیکاتور اختلال ایجاد کنند.صابون ها یا مواد ضدعفونی کننده ممکن است در واکنش آنتی بادی-آنتی ژن تداخل ایجاد کنند.
مواد تداخلی بالقوه در غلظت هایی که ممکن است به طور منطقی در ترشحات سرویکوواژینال یافت شوند آزمایش شدند.وقتی در سطوح نشان داده شده آزمایش شد، مواد زیر در سنجش تداخلی نداشتند.
| ماده | تمرکز | ماده | تمرکز |
| آمپی سیلین | 1.47 میلی گرم در میلی لیتر | پروستاگلاندین F2 | a0.033 میلی گرم در میلی لیتر |
| اریترومایسین | 0.272 میلی گرم در میلی لیتر | پروستاگلاندین E2 | 0.033 میلی گرم در میلی لیتر |
| ادرار مادر سه ماهه سوم | 5% (جلد) | MonistatR (میکونازول) | 0.5 میلی گرم در میلی لیتر |
| اکسی توسین | 10 IU/ml | کارمین نیل | 0.232 میلی گرم در میلی لیتر |
| تربوتالین | 3.59 میلی گرم در میلی لیتر | جنتامایسین | 0.849 میلی گرم در میلی لیتر |
| دگزامتازون | 2.50 میلی گرم در میلی لیتر | ژل BetadineR | 10 میلی گرم در میلی لیتر |
| MgSO4•7H2O | 1.49 میلی گرم در میلی لیتر | پاک کننده BetadineR | 10 میلی گرم در میلی لیتر |
| ریتودرین | 0.33 میلی گرم در میلی لیتر | ژله K-YR | 62.5 میلی گرم در میلی لیتر |
| DermicidolR 2000 | 25.73 میلی گرم در میلی لیتر |
منابع ادبیات
1. کالج آمریکایی متخصصین زنان و زایمان.زایمان زودرسبولتن فنی، شماره 133، مهر 1368.
2. Creasy RK، Resnick R. Maternal and Fetal Medicine: Principles and Practice.فیلادلفیا: WB Saunders;1989.
3. Creasy RK، Merkatz IR.پیشگیری از زایمان زودرس: نظر بالینیObstet Gynecol 1990؛ 76 (Suppl 1): 2S-4S.
4. موریسون جی سی.زایمان زودرس: پازلی که ارزش حل کردن دارد.Obstet Gynecol 1990;76(Suppl 1):5S-12S.
5. Lockwood CJ، Senyei AE، Dische MR، Casal DC، و همکاران.فیبرونکتین جنین در ترشحات دهانه رحم و واژن به عنوان پیش بینی کننده زایمان زودرسNew Engl J Med 1991؛ 325:669-74.
واژه نامه نمادها
|
| شماره کاتالوگ |  | محدودیت دما |
 | برای استفاده با دستورالعمل ها مشورت کنید |
| کد دسته ای |
 | دستگاه پزشکی تشخیصی آزمایشگاهی |  | استفاده شده توسط |
 | سازنده |  | حاوی کافی برایتست ها |
 | استفاده مجدد نکنید |  | نماینده مجاز در جامعه اروپا |
 | دارای علامت CE بر اساس دستورالعمل دستگاه های پزشکی IVD 98/79/EC | ||
Liming Bio-Products Co., Ltd.
شماره 12 جاده هوایوان، نانجینگ، جیانگ سو، 210042 PR چین.
تلفن: (0086)25 85476723 فکس: (0086)25 85476387
پست الکترونیک:sales@limingbio.com
وب سایت: www.limingbio.com
www.stddiagnostics.com
www.stidiagnostics.com
WellKang Ltd.(www.CE-marking.eu) تلفن: +44(20)79934346
خیابان هارلی 29، لندن WIG 9QR، فکس بریتانیا: 76811874 (20) +44
دستگاه تست سریع فیبرونکتین جنینی StrongStep®
زایمان زودرس که توسط کالج آمریکایی متخصصین زنان و زایمان به عنوان زایمان قبل از هفته سی و هفتم بارداری تعریف شده است، مسئول اکثر عوارض و مرگ و میر پری ناتال غیر کروموزومی است.علائم تهدید زایمان زودرس شامل انقباضات رحمی، تغییر ترشحات واژن، خونریزی واژینال، کمردرد، ناراحتی شکمی، فشار لگن و گرفتگی است.روش‌های تشخیصی برای شناسایی خطر زایمان زودرس شامل نظارت بر فعالیت رحم و انجام معاینه دیجیتالی دهانه رحم است که امکان تخمین ابعاد دهانه رحم را فراهم می‌کند.
تست سریع فیبرونکتین جنینی StrongStep یک تست ایمونوکروماتوگرافی با تفسیر بصری است که برای تشخیص کیفی فیبرونکتین جنینی در ترشحات دهانه رحم با ویژگی‌های زیر استفاده می‌شود:
کاربر پسند:روش تک مرحله ای در آزمون کیفی
سریع:تنها 10 دقیقه در طول ویزیت همان بیمار لازم است
بدون تجهیزات:بیمارستان های محدود کننده منبع یا محیط بالینی می توانند این آزمایش را انجام دهند
تحویل داده شده:دمای اتاق (2℃-30℃)
