کیت ویروسی کرون ویروس (SARS-CoV-2) Multiplex در زمان واقعی PCR
این کیت PCR بسیار حساس و آماده برای استفاده در قالب لیوفیلیزه (فرایند خشک کردن یخ) برای ذخیره سازی طولانی مدت در دسترس است. کیت قابل حمل و نگهداری در دمای اتاق است و به مدت یک سال پایدار است. هر لوله از پیش مخلوط شامل تمام معرفهای مورد نیاز برای تقویت PCR ، از جمله بسترهای Reverse-transcriptase ، Taq polymerase ، آغازگرها ، پروب ها و dNTP ها می باشد. فقط به 13ul آب مقطر و 5 R الگوی RNA استخراج شده نیاز دارد ، سپس می توان آن را بر روی ابزار PCR اجرا و تقویت کرد.
دستگاه qPCR باید شرایط زیر را داشته باشد:
1. لوله لوله PCR 8 نواری را 0.2 میلی لیتر قرار دهید
2. بیش از چهار کانال شناسایی داشته باشید:
کانال |
تحریک (نانومتر) |
انتشار (nm) |
رنگهای پیش کالیبره شده |
1 |
470 |
525 |
FAM ، SYBR Green I |
2 |
523 |
564 |
VIC ، HEX ، TET ، JOE |
3 |
571 |
621 |
ROX ، TEXAS-RED |
4 |
630 |
670 |
CY5 |
سیستم عامل های PCR:
7500Real-time PCR System، Biorad CF96، iCycler iQ System Real-Time PCR System Detection، Stratagene Mx3000P، Mx3005P
دشواری انتقال زنجیره سرد معرف تشخیص اسید نوکلئیک Novel Coronavirus
هنگامی که معرفهای معمولی تشخیص اسید نوکلئیک در مسافت زیادی منتقل می شوند ، ذخیره (20 ± 5) chain ذخیره زنجیره سرد و حمل و نقل برای اطمینان از فعال ماندن فعال زیستی آنزیم مورد نیاز است. برای اطمینان از رسیدن دما به حد استاندارد ، برای هر جعبه معرف آزمایش اسید نوکلئیک حتی کمتر از 50 گرم به چند کیلوگرم یخ خشک نیاز است ، اما فقط دو یا سه روز ادامه دارد. از نظر رویه صنعت ، وزن واقعی معرفهای صادر شده توسط تولید کنندگان کمتر از 10٪ (یا به مراتب کمتر از این مقدار) ظرف است. بیشتر وزن ناشی از یخ خشک ، بسته های یخ و جعبه های کف است ، بنابراین هزینه حمل و نقل بسیار بالا است.
در مارس 2020 ، COVID-19 شروع به گسترش در مقیاس وسیعی در خارج از کشور کرد ، و تقاضا برای معرف کشف اسید نوکلئیک نوول کرونا ویروس به طرز چشمگیری افزایش یافت. با وجود هزینه بالای صادرات واکنشگرها در زنجیره سرد ، اکثر تولیدکنندگان به دلیل مقدار زیاد و سود زیاد هنوز می توانند آن را بپذیرند.
با این حال ، با بهبود سیاست های ملی صادرات برای محصولات ضد همه گیر ، و همچنین ارتقا control کنترل ملی بر جریان مردم و تدارکات ، گسترش و عدم اطمینان در زمان حمل و نقل واکنشگرها ، که منجر به مشکلات برجسته محصول ایجاد شده است توسط حمل و نقل. مدت زمان طولانی حمل و نقل (زمان حمل و نقل تقریباً نیمی از ماه بسیار معمول است) منجر به خرابی مکرر محصول در هنگام رسیدن کالا به مشتری می شود. این امر بیشتر شرکتهای صادر کننده معرف اسید نوکلئیک را دچار مشکل کرده است.
فناوری لیوفیلیزه شده برای واکنش PCR به حمل و نقل معرف ردیابی اسید نوکلئیک Coronavirus در سراسر جهان کمک کرد
معرفهای PCR لیوفیلیزه شده را می توان در دمای اتاق حمل و نگهداری کرد ، که نه تنها می تواند هزینه حمل و نقل را کاهش دهد ، بلکه از مشکلات کیفی ناشی از فرآیند حمل و نقل جلوگیری می کند. بنابراین لیوفیلیزاسیون معرف بهترین راه برای حل مشکل حمل و نقل صادراتی است.
لیوفیلیزاسیون شامل انجماد یک محلول به حالت جامد و سپس بخار آب را تحت شرایط خلا sub تصعید و جدا می کند. املاح خشک شده با همان ترکیب و فعالیت در ظرف باقی می ماند. در مقایسه با معرفهای مایع متداول ، معرف تشخیصی اسید نوکلئیک جدید رمان Coronavirus لیوفیلیزه شده و تولید شده توسط Liming Bio دارای مشخصات زیر است:
پایداری گرما بسیار قوی: می تواند با درمان ایستاده در دمای 56 ℃ به مدت 60 روز ، و مورفولوژی و عملکرد معرف بدون تغییر باقی بماند.
ذخیره و حمل و نقل دمای طبیعی: بدون نیاز به زنجیره سرد ، بدون نیاز به ذخیره در دمای پایین قبل از آب بندی ، فضای ذخیره سازی سرد را کاملاً آزاد کنید.
آماده برای استفاده: لیوفیلیزه کردن تمام اجزا ، عدم نیاز به پیکربندی سیستم ، جلوگیری از از دست دادن اجزای دارای ویسکوزیته بالا مانند آنزیم.
اهداف چندگانه در یک لوله: هدف تشخیص ژن ORF1ab ویروس کرونا ویروس جدید ، ژن N ، ژن S را پوشش می دهد تا از ایجاد تغییر در ویروس جلوگیری کند. به منظور کاهش منفی کاذب ، از ژن RNase P انسانی به عنوان کنترل داخلی استفاده می شود تا نیاز بالینی برای کنترل کیفیت نمونه را برآورده کند.