کیت PCR بلادرنگ مالتی پلکس کروناویروس جدید (SARS-CoV-2).
این کیت بسیار حساس و آماده برای استفاده PCR در قالب لیوفیلیزه (فرایند خشک کردن انجمادی) برای نگهداری طولانی مدت موجود است.کیت در دمای اتاق قابل حمل و نگهداری است و به مدت یک سال پایدار است.هر لوله از پیش مخلوط حاوی تمام معرف های مورد نیاز برای تقویت PCR، از جمله رونوشت معکوس، پلیمراز Taq، پرایمرها، پروب ها و بسترهای dNTPs می باشد.فقط نیاز به اضافه کردن 13 لیتر آب مقطر و 5 لیتر الگوی RNA استخراج شده دارد، سپس می توان آن را اجرا کرد و روی ابزار PCR تقویت کرد.
دستگاه qPCR باید شرایط زیر را برآورده کند:
1. 8 نوار لوله PCR حجم 0.2 میلی لیتر
2. بیش از چهار کانال شناسایی داشته باشید:
| کانال | تحریک (nm) | انتشار (nm) | رنگ های از پیش کالیبره شده |
| 1. | 470 | 525 | FAM، SYBR گرین I |
| 2 | 523 | 564 | VIC، HEX، TET، JOE |
| 3. | 571 | 621 | راکس، تگزاس-رد |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
پلت فرم های PCR:
7500Real-Time PCR System، Biorad CF96، iCycler iQ™ Real-Time PCR Detection System، Stratagene Mx3000P، Mx3005P
دشواری حمل و نقل با زنجیره سرد معرف تشخیص نوکلئیک اسید نوکلئیک ویروس کرونا
هنگامی که معرف های تشخیص اسید نوکلئیک معمولی در مسافت های طولانی حمل می شوند، ذخیره سازی و حمل و نقل زنجیره سرد (20±5) ℃ مورد نیاز است تا اطمینان حاصل شود که فعال زیستی آنزیم در معرف ها فعال باقی می ماند.برای اطمینان از رسیدن دما به حد استاندارد، برای هر جعبه معرف آزمایش اسید نوکلئیک حتی کمتر از 50 گرم به چندین کیلوگرم یخ خشک نیاز است، اما فقط دو یا سه روز دوام می آورد.از دیدگاه عملکرد صنعت، وزن واقعی معرف های صادر شده توسط تولید کنندگان کمتر از 10٪ (یا بسیار کمتر از این مقدار) ظرف است.بیشتر وزن از یخ خشک، کیسه های یخ و جعبه های فوم حاصل می شود، بنابراین هزینه حمل و نقل بسیار بالا است.
در مارس 2020، کووید-19 در مقیاس وسیعی در خارج از کشور شیوع پیدا کرد و تقاضا برای معرف تشخیص نوکلئیک اسید نوکلئیک ویروس کرونا به طور چشمگیری افزایش یافت.با وجود هزینه بالای صادرات معرف در زنجیره سرد، اکثر تولیدکنندگان به دلیل حجم زیاد و سود بالا همچنان می توانند آن را بپذیرند.
با این حال، با بهبود سیاست های صادرات ملی برای محصولات ضد همه گیر و همچنین ارتقاء کنترل ملی بر تردد افراد و تدارکات، تمدید و عدم اطمینان در زمان حمل و نقل معرف ها ایجاد شده است که منجر به مشکلات برجسته محصول شده است. توسط حمل و نقلطولانی شدن زمان حمل و نقل (زمان حمل و نقل حدود نیم ماه بسیار متداول است) زمانی که محصول به دست مشتری می رسد منجر به خرابی مکرر محصول می شود.این موضوع اکثر شرکت های صادراتی معرف اسید نوکلئیک را با مشکل مواجه کرده است.
فناوری لیوفیلیزه برای معرف PCR به انتقال معرف تشخیص نوکلئیک اسید نوکلئیک ویروس کرونا در سراسر جهان کمک کرد.
معرف های PCR لیوفیلیزه شده را می توان در دمای اتاق حمل و نگهداری کرد، که نه تنها می تواند هزینه حمل و نقل را کاهش دهد، بلکه از مشکلات کیفیت ناشی از فرآیند حمل و نقل جلوگیری می کند.بنابراین لیوفیلیزه کردن معرف بهترین راه برای حل مشکل حمل و نقل صادراتی است.
لیوفیلیزاسیون شامل انجماد محلول به حالت جامد و سپس تصعید و جداسازی بخار آب در شرایط خلاء است.املاح خشک شده با همان ترکیب و فعالیت در ظرف باقی می ماند.در مقایسه با معرف‌های مایع معمولی، معرف تشخیص نوکلئیک اسید نوکلئیک کروناویروس جدید لیوفیلیزه تمام جزئی تولید شده توسط Liming Bio دارای ویژگی‌های زیر است:
پایداری حرارتی بسیار قوی:می تواند با درمان ایستاده در دمای 56 درجه سانتیگراد به مدت 60 روز، و مورفولوژی و عملکرد معرف بدون تغییر باقی می ماند.
ذخیره سازی و حمل و نقل دمای معمولی:بدون نیاز به زنجیر سرد، بدون نیاز به نگهداری در دمای پایین قبل از آب بندی، فضای ذخیره سازی سرد را به طور کامل آزاد کنید.
آماده برای استفاده:لیوفیلیزه کردن تمام اجزا، عدم نیاز به پیکربندی سیستم، جلوگیری از از دست دادن اجزای با ویسکوزیته بالا مانند آنزیم.
اهداف چندگانه در یک لوله:هدف شناسایی، ژن ORF1ab جدید کروناویروس، ژن N، ژن S را برای جلوگیری از ژنواریاسیون ویروس پوشش می‌دهد.به منظور کاهش منفی کاذب، از ژن RNase P انسانی به عنوان کنترل داخلی استفاده می شود تا نیاز بالینی برای کنترل کیفیت نمونه برآورده شود.
