دستگاه سیستم StrongStep برای تست سریع آنتی ژن SARS-COV-2
استفاده در نظر گرفته شده
دستگاه سیستم StrongStep® برای آزمایش سریع آنتی ژن SARS-COV-2 از فناوری ایمونوکروماتوگرافی برای تشخیص آنتی ژن Nucleocapsid SARS- COV-2 در بزاق انسان استفاده می کند. این تست فقط یکبار مصرف است و برای آزمایش SEI در نظر گرفته شده است. توصیه می شود طی 7 روز از شروع علائم از این آزمایش استفاده کنید و توسط ارزیابی عملکرد بالینی پشتیبانی می شود.
مقدمه
رمان Coronaviruses متعلق به جنس 0 است. COVID-19 یک بیماری عفونی حاد تنفسی است. مردم به طور کلی مستعد هستند. در حال حاضر ، بیماران آلوده به Coronavirus رمان منبع اصلی عفونت بر اساس تحقیقات اپیدمیولوژیک فعلی هستند ، دوره جوجه کشی 1 تا 14 روز است که بیشتر 3 تا 7 روز است. تظاهرات اصلی شامل تب ، خستگی و سرفه خشک است. احتقان بینی ، آبریزش بینی ، گلو درد ، میالژی و اسهال در چند مورد یافت می شود.
اصل
دستگاه سیستم StrongStep® برای آزمون آنتی ژن SARS-COV-2 از آزمایش ایمونوکروماتوگرافی استفاده می کند ، این کیت نمونه های بزاق را از چوب جذب بزاق در جلوی کارت آزمایش جمع می کند و نمونه های بزاق تحت عمل مویرگی به جلو حرکت می کنند. اگر نمونه حاوی آنتی ژن پروتئین SARS-COV-2 N باشد. توسط آنتی بادی های برچسب زده شده در سطح لاتکس مشخص شده و محدود می شود تا یک مجموعه ایمنی تشکیل شود. هنگامی که مجتمع ایمنی تشکیل شده به خط تشخیص غشای فیبر اسید نیتریک مهاجرت می کند ، برای شناسایی آنتی بادی های بسته بندی شده و تشکیل یک خط تشخیص فوسی (T-LINS) ، آنتی ژن SARS-COV-2 را مثبت نشان می دهد. اگر خط t نشان نداد ، نتیجه منفی است. خط دیگر در غشای فیبر اسید نیتریک با آنتی بادی های استرپتاویدین به عنوان یک خط کنترل کیفیت (خط C) بسته بندی شده است تا یک فرآیند آزمایش مؤثر را نشان دهد.
موارد احتیاط
• این کیت فقط برای استفاده در شرایط آزمایشگاهی تشخیصی است.
• این کیت با پیروی از دستورالعمل های عملیاتی توسط پرسنل پزشکی یا غیر پزشکی قابل اجرا است.
• قبل از انجام آزمون دستورالعمل ها را با دقت بخوانید.
• این محصول حاوی مواد منبع انسانی نیست.
• از محتوای کیت پس از تاریخ انقضا استفاده نکنید.
• همه نمونه ها را به عنوان عفونی بالقوه کنترل کنید.
• معرف پیپت را از طریق دهان و در هنگام انجام سنجش سیگار کشیدن یا غذا خوردن نکنید.
• در کل روش دستکش بپوشید.
ذخیره و ثبات
کیسه های مهر و موم شده در کیت آزمایش ممکن است برای مدت زمان ماندگاری بین 2-30 درجه سانتیگراد ذخیره شوند ، همانطور که در کیسه نشان داده شده است.
جمع آوری و ذخیره نمونه
بهترین نمونه بزاق باید بعد از بیدار شدن صبح جمع شود. 30 دقیقه قبل از جمع آوری نمونه بزاق خود چیزی نخورید و ننوشید. این کار را قبل از قهوه ، خوردن صبحانه یا مسواک زدن دندان های خود انجام دهید - یا صبر کنید تا در 30 دقیقه قبل چیزی مصرف نکرده باشید.
عمل
قبل از استفاده آزمایشات را به دمای اتاق (15-30 درجه سانتیگراد) بیاورید.
مرحله 1:
کیف را باز کنید ، دستگاه تست را بیرون بیاورید ، پوشش انتهای دستگاه تست را باز کنید.
مرحله 2:
• کاست را نگه دارید ، چوب جذب بزاق را زیر زبان قرار دهید ، جذب آن را بچسبانید و زبان را حداقل برای 120 ثانیه محکم کنید.
• دستگاه را به سمت راست نگه دارید و بگذارید مایعات بزاق تا به سمت بالا حرکت کنند تا رسیدن به خط C ، سپس درپوش را به عقب وصل کنید.
• دستگاه را به صورت افقی روی میز کار قرار دهید.
مرحله 3:
15 دقیقه بعد دوباره زمان را دوباره بخوانید.
با خیال راحت زباله ها را درون ظرف Biohaz-Ad پرتاب کنید.
کنترل کیفیت
کنترل های رویه داخلی در آزمون گنجانده شده است. یک باند آبی که در منطقه کنترل (C) ظاهر می شود به عنوان یک کنترل رویه داخلی در نظر گرفته می شود. این حجم نمونه کافی و تکنیک رویه صحیح را تأیید می کند.
محدودیت های آزمون
1. این کیت برای تشخیص کیفی آنتی ژن های SARS-COV-2 از بزاق استفاده شده است.
2. این آزمایش هر دو SARS-COV-2 قابل دوام (زنده) و غیر قابل استفاده را تشخیص می دهد. عملکرد آزمایش به میزان ویروس (آنتی ژن) در نمونه بستگی دارد و ممکن است با نتایج کشت ویروسی انجام شده در همان نمونه ارتباط نداشته باشد.
3. اگر سطح آنتی ژن موجود در یک نمونه زیر حد تشخیص آزمایش باشد یا اینکه نمونه جمع آوری شده یا به صورت نادرست منتقل شده است ، نتیجه آزمایش منفی ممکن است رخ دهد.
4. عدم پیروی از روش آزمون ممکن است بر عملکرد آزمون تأثیر منفی بگذارد و یا نتیجه آزمون را باطل کند.
5. کیت فقط برای غربالگری پیش فرض است. نتایج منفی عفونت SARS-COV-2 را رد نمی کند و فرد عفونی نیست. اگر علائم وجود دارد ، به دنبال آزمایش فوری باشید.
6. نتایج آزمون باید با تاریخ بالینی ، داده های اپیدمیولوژیک و سایر داده های موجود برای پزشک ارزیابی کننده بیمار ارتباط داشته باشد.
7. نتایج آزمایش مثبت با سایر عوامل بیماری زا عفو نمی کند و لزوماً نمی تواند تعیین کند که آیا فرد عفونی است یا خیر.
8. نتایج آزمایش منفی در نظر گرفته نشده است که در سایر عفونت های ویروسی یا باکتریایی غیر SARS حاکم باشد.
9. نتایج منفی از بیماران مبتلا به علائم ، باید به عنوان پیش فرض درمان شود و با استفاده از روش مولکولی مجاز FDA محلی ، در صورت لزوم ، برای مدیریت بالینی ، از جمله کنترل عفونت ، تأیید شود.
10. توصیه های پایداری نمونه بر اساس داده های پایداری از آزمایش آنفلوانزا است و عملکرد ممکن است با SARS-COV-2 متفاوت باشد. کاربران باید پس از جمع آوری نمونه ، نمونه ها را در اسرع وقت آزمایش کنند.
11. حساسیت برای سنجش RT-PCR در تشخیص COVID-19 تنها 50 ٪ -80 ٪ به دلیل کیفیت پایین نمونه یا زمان بیماری در مرحله بهبودی و غیره است. به دلیل روش شناسی پایین تر.
12. مقادیر پیش بینی مثبت و منفی به میزان شیوع بستگی دارد.
نتایج آزمایش مثبت به احتمال زیاد نتایج مثبت کاذب را در دوره های فعالیت کمی / NO SARS-COV-2 نشان می دهد که شیوع بیماری کم است. نتایج آزمایش منفی در هنگام شیوع بیماری ناشی از SARS-COV-2 زیاد است.
13. آنتی بادی های مونوکلونال ممکن است در تشخیص ویروس های آنفلوانزا SARS-COV-2 که تحت تغییر اسید آمینه جزئی در منطقه اپی توپ هدف قرار گرفته اند ، تشخیص دهند و یا با حساسیت کمتری تشخیص دهند.
14. عملکرد این آزمایش برای استفاده در بیماران بدون علائم و علائم عفونت تنفسی و عملکرد ممکن است در افراد بدون علامت متفاوت باشد.
15. میزان آنتی ژن در یک نمونه ممکن است با افزایش مدت بیماری کاهش یابد.
نمونه های جمع آوری شده پس از روز 7 بیماری در مقایسه با یک روش RT-PCR منفی هستند.
حساسیت آزمایش پس از هفت روز از شروع علائم در مقایسه با یک روش RT-PCR شناخته شده است.
16. توصیه نمی شود که در این آزمون از نمونه های حمل و نقل ویروس (VTM) استفاده کنید ، اگر مشتریان اصرار دارند از این نوع نمونه استفاده کنند ، مشتریان باید خود را تأیید کنند.
17. آزمایش مکرر برای افزایش حساسیت تشخیص COVID-19 لازم است.
18. بدون مقایسه با نوع وحشی با توجه به انواع زیر -B.1.1.7 ، حساسیت را کاهش دهید. B.1.351 ؛ b.1.2 ؛ B.1.1.28 ؛ B.1.617 ؛ B.1.1.529.
19. نتایج مثبت نشان می دهد که آنتی ژن های ویروسی در نمونه گرفته شده ، لطفاً خود پنجه گذاری شده و به پزشک خانواده خود سریعاً و/یا بخش بهداشت محلی خود را مطابق با نیازهای دولتی تشخیص داده و به پزشک خانواده خود اطلاع دهید.
توافق درصد مثبت: (PPA) = 98.02 ٪ (93.03 ~ 99.76 ٪)*
توافق درصد منفی: (NPA) = 100 ٪ (98.23 ～ 100 ٪)*
نرخ همزمان کل = 98.76 ٪
*فاصله اطمینان 95 ٪
عملکرد تحلیلی
الف) حد تشخیص (LOD):
حد تشخیص (LOD) آزمایش با استفاده از محدود کننده رقیق کننده SARS-COV-2 غیرفعال تعیین شد. این یک آماده سازی از Coronavirus-2 مربوط به SARS (SARS-COV-2) است که در CDC چین جدا می شود ، که توسط β- پروپیولاکتون غیرفعال شده است. این ماده با غلظت TCID منجمد شد50از 5.00 x105/میلی لیتر
برای تعیین SARS-COV-2 برای بازتاب سنجش هنگام استفاده از بزاق مستقیم. در این مطالعه تقریباً 50μl از رقت ویروس با نمونه منفی بزاق سنبله شد.
LOD در سه مرحله تعیین شد:
1. غربالگری LOD
رقت 10 برابر ویروس غیرفعال در بزاق منفی انجام شد و برای هر مطالعه همانطور که در بالا توضیح داده شد پردازش شد. این رقت ها به صورت سه گانه مورد آزمایش قرار گرفتند. غلظت نشان دهنده 3 از 3 مثبت برای یافتن دامنه LOD انتخاب شد.
2. یافتن محدوده LOD
پنج (5) رقت دو برابر از TCID ساخته شد50از 5.00 x102غلظت /میلی لیتر در بزاق منفی پردازش شده برای مطالعه همانطور که در بالا توضیح داده شد. این رقت ها به صورت سه گانه مورد آزمایش قرار گرفتند. غلظت نشان دهنده 3 از 3 مثبت برای تأیید LOD انتخاب شد.
3. تأیید LOD
غلظت TCID50از 2.50 x102رقت /میلی لیتر برای کل بیست (20) نتیجه مورد آزمایش قرار گرفت. حداقل نوزده (19) از بیست (20) نتیجه مثبت بود.
نتیجه گیری:
بر اساس این آزمایش ، غلظت به این صورت تأیید شد:
LOD: TCID502.50 x102/ML
ب) واکنش متقابل:
واکنش متقاطع دستگاه StrongStep® دستگاه SARS-COV-2 آنتی ژن آزمایش سریع با آزمایش میکروارگانیسم های مختلف (10 درجه cfu/ml) ، ویروس ها (10⁵ PFU/ml) و ماتریس های منفی که ممکن است به طور بالقوه با StrongStep® واکنش نشان دهند. تست سریع دستگاه SARS-COV-2 آنتی ژن.
هر ارگانیسم و ویروس به صورت سه گانه مورد آزمایش قرار گرفتند. بر اساس داده های تولید شده توسط این مطالعه ، دستگاه سیستم StrongStep® برای آزمایش سریع آنتی ژن SARS-COV-2 با ارگانیسم ها یا ویروس های آزمایش شده واکنشی نشان نمی دهد.
ج) ماده دخالت:
مواد مداخله کننده بالقوه از آزمایش سریع آنتی ژن StrongStep® SARS-COV-2 با آزمایش مواد مختلف با غلظت زیر که ممکن است به طور بالقوه با آزمایش سریع آنتی ژن SARS-COV-2 تداخل داشته باشد ، مورد بررسی قرار گرفت. هر ماده به صورت سه گانه مورد آزمایش قرار گرفت. بر اساس داده های تولید شده توسط این مطالعه ، آزمایش سریع آنتی ژن StrongSTEP® SARS-COV-2 با مواد آزمایش شده تداخل نمی کند.
د) اثر قلاب
بالاترین غلظت سهام SARS-COV-2 در دسترس با گرما موجود است (TCID50از 5.00 x 105/ML) مورد آزمایش قرار گرفت. هیچ اثر قلاب تشخیص داده نشده است.
